DETERMINAZIONE DELL’ANIDRIDE FOSFORICA ASSIMILABILE

Il fosforo presente nel terreno viene convenzionalmente espresso come anidride fosforica (P₂O₅) in forma assimilabile, ioè disponibile per le piante.

L'anidride fosforica totale riveste scarsa importanza in quanto le frazioni non assimilabili risultano insolubili come fosfato di calcio o di alluminio o ferrino (a seconda del pH) o legate in forma organica.

Proprio a causa della scarsa mobilità del fosforo esso viene somministrato come concime prima dell'impianto o della semina (meglio se alla fine dell'inverno tra febbraio e marzo).

La dotazione sufficiente di anidride fosforica è dello 0,1¸0,3 ‰.

Metodo Olsen- Watanabe

Il metodo è applicabile ai terreni con pH in acqua superiore a 6,5

Principio:

Il metodo si basa sulla capacità del sodio bicarbonato di abbassare l'attività degli ioni calcio, consentendo l'estrazione dell'aliquota di fosforo legata al calcio o coprecipitata con il carbonato di calcio.

Il fosforo così estratto viene dosato per via spettrofotometrica mediante sviluppo del complesso fosfomolibdico colorato in blu.

Materiale:

• Spettrofotometro
  
• 2 beute da 250 ml
  
• 2 pipette da 5 ml


• 2 pipette da 20 ml


• 3 pipette da 50 ml
  
• 3 matracci da 100 ml


• pallone da 1000 ml
  
• agitatore magnetico
  

Reattivi:

• soluzione estraente di carbonato-bicarbonato sodico 0,5 M a pH 8,5 (preparata sciogliendo 42 g di bicarbonato di sodio in 1 l di acqua e aggiungendovi 4,5 ml di idrossido di sodio al 20 % fino a pH 8,5)
  
• carbone attivo (lavarlo per depurarlo da eventuale presenza di fosfati: agitare il carbone con soluzione estraente; raccoglier il carbone su imbuto di Büchner e lavare più volte con acqua distillata; essiccare in stufa a 110° C; siccome possono restare ancora tracce di fosfati si rende necessario determinare il contenuto di fosfati su 1 g di carbone lavato e poi sottrarre questo dato da quello fissato nel terreno)
  
• soluzione di molibdato ammonico: sciogliere in un matraccio da 100 ml 7,2 g di molibdato ammonico in polvere in 250 ml di acqua e raffreddare; in un altro pallone versare 250 ml di acqua e, cautamente, 107 ml (cioè 196,8 g) di acido solforico concentrato (con d = 1,84); raffreddare e versare nel matraccio da 1000 ml; raffreddare e portare a volume con acqua deionizzata (conservare la soluzione in bottiglia scura)


• soluzione riducente: soluzione acquosa di acido ascorbico al 2,5% (preparata giornalmente)
  
• soluzione di fosfato: sciogliere in un po' d'acqua 0,1917 g di fosfato biacido di potassio (KH₂PO₄) e portare al volume di 1 l con acqua deionizzata, agitare bene, prelevare 200 ml e portare a 1 l con acqua distillata; 1 ml di questa soluzione contiene 0,02 mg di P₂O₅


• acido solforico concentrato.
  

Costruzione della curva di taratura

In 6 matracci tarati da 100 ml si versano 50 ml della soluzione estraente. Si aggiungono cautamente e agitando 1,5 ml di acido solforico concentrato; si agita fino alla cessazione dell'effervescenza. Quindi si aggiungono rispettivamente 0 – 5 – 10 – 15 – 20 – 25 ml di soluzione di fosfato (contenenti 0,02 mg/ml di P₂O₅).

Le prove contengono 0 ,1,2,3,4 e 5 mg/L di P₂O₅ Si agita e si aggiungono lentamente 20 ml di soluzione di molibdato ammonico e 2 ml di soluzione di acido ascorbico. Si agita e si pongono i matracci su bagnomaria bollente per 30 minuti. Si raffredda e si porta a volume con acqua distillata.

Si misura poi l'estizione di ogni soluzione a 650 nm contro la prova in bianco (quella cioè priva di P₂O₅). Si traccia la retta di taratura ponendo sulle ascisse le concentrazioni delle soluzioni colorate in blu (espresse in mg di P₂O₅/ml) e sulle ordinate l'estinzione.

Modo di operare:

• Porre in beuta 5 g di terra fine essiccata all'aria e poi in stufa a 110°C.
  
• Aggiungere 1 g di carbone attivo (lavato ed essiccato) e 100 ml di soluzione estraente.
  
• Agitare con agitatore magnetico per 30 min. e filtrare su filtro asciutto. Se il filtrato risulta colorato occorre ripetere l'operazione aumentando la dose di carbone.
  
• In parallelo si ripete l'operazione in beuta senza terreno (prova in bianco).
  
• In tre matracci porre: 50 ml di soluzione estraente, 50 ml di filtrato del solo carbone, 50 ml di filtrato del terreno.
  
• Aggiungere, con cautela, 1,5 ml di acido solforico concentrato e agitare cautamente fino al cessare dell'effervescenza.
  
• Aggiungere 20 ml di acqua distillata, 20 ml di soluzione di molibdato ammonico e 2 ml della soluzione riducente.
  
• Porre i matracci su bagnomaria bollente per 0 min.
  
• Raffreddare.


• Portare a volume con acqua deionizzata.


• Misurare l'estinzione a 650 nm contro la prova con sola soluzione estraente.


• Per calcolare la quantità di fosfati assimilabili servirsi della retta di taratura.
  

Osservazioni:

• Questo metodo risulta il più adatto per i terreni calcarei in quanto lo ione bicarbonato agisce abbassando l'attività degli ioni Ca²⁺ (precipitazione di CaCO₃) e provocando la solubilizzazione di una parte del fosfato di calcio.
  
• Nei terreni neutri e acidi, il pH tamponato a 8,5 evita la solubilizzazione di eccessive dosi di fosfato legato al ferro o all'alluminio e le precipitazioni secondarie che si avrebbero a pH più elevati.


• L'acido ascorbico riduce l'acido fosfomolibdico.

CONCENTRAZIONE P₂O₅ campione = 8,339 mg/L

CONCENTRAZIONE P₂O₅ sol.estraente = 0,68 mg/L

VALORE OTTENUTO P₂O₅ = 7,66 mg/L 0 circa 8 ppm